La Reserva se encuentra ubicada en la desembocadura del río Guadalquivir, ocupando una superficie total de 404 Km2. Comprende los últimos 16,5 Km del cauce principal del río, desde el Caño de la Esparraguera (Sevilla) hasta Sanlúcar de Barrameda (Cádiz), hacia el sur; y la franja litoral del Parque Nacional de Doñana hasta el Pico del Loro (Huelva), en dirección norte. Sus fondos alternan entre superficies arenosas, por toda la franja litoral y fangosos más próximos a la zona de la desembocadura. Esto proporciona un hábitat adecuado a varias especies de moluscos bivalvos y también peces planos como el lenguado y la acedía, siendo éstas muy representativas en la zona. La Reserva se encuentra dividida en cuatro zonas en función de las características del medio físico y biológico, y de las pesquerías que en ella se desarrollan, aplicándose, en cada una de ellas, medidas de gestión específicas.
La reserva se divide en tres zonas: a,b,c y d.
Esta permitido pescar en todas las zonas, exepto en la zona a donde solo se permite el marisqueo a pie con licencia titulada.
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